Impurezas de tirzepatida

Impurezas de tirzepatida|Control de impurezas de tilpéptido|Síntesis personalizada de impurezas y confirmación de estructura|Ciencia-Péptido

Tirzepatida Control de impurezas - para GLP-1/GIP dual-investigación de calidad de medicamento objetivo, informes de medicamentos genéricos. Science-Peptide proporciona síntesis personalizada de impurezas relacionadas con tilpéptidos, incluidos péptidos de deleción, impurezas oxidadas, productos de exfoliación de ácidos grasos, dímeros, etc., con datos de confirmación estructural para respaldar su estudio de espectroscopia de impurezas con confirmación estructural. datos. Bienvenido a contactarnos.

Tirzepatide (Tirzepatide) es el agonista dual GLP-1/GIP que se le ocurrió a Eli Lilly, y ha estado en pleno apogeo estos dos años. Tiene un buen efecto para reducir el azúcar y un fuerte efecto para reducir el peso, y se le llama la versión mejorada de "el medicamento milagroso para bajar de peso". Muchos fabricantes nacionales de medicamentos genéricos peptídicos se están fijando en ello: después de la expiración de la patente, quién podrá comprobar primero la calidad de la investigación y quién tendrá la oportunidad de hacerse con el primer genérico.

 

Sin embargo, la calidad del tilpéptido no es tan fácil de estudiar. Es más complejo que la simeticona, con 39 aminoácidos, una cadena lateral de ácido graso (ácido eicosanodioico) y un conector. Las impurezas que pueden aparecer durante el proceso de síntesis son mucho mayores que las de los péptidos comunes. Los péptidos faltantes, las impurezas oxidativas, los productos de eliminación de ácidos grasos, los dímeros y las impurezas relacionadas con el enlazador-tienen que tener un control, cada uno tiene que ser claro.

 

Hemos acumulado mucha experiencia en la síntesis de impurezas peptídicas complejas. Nos hemos especializado en el estudio del tilpéptido, y sabemos cuáles son las dificultades en su perfil de impurezas y cuáles son los elementos de control imprescindibles. Podemos personalizar la síntesis de varios controles de impurezas de tilpéptidos según sus necesidades, con datos de confirmación de estructura, y ayudarle a establecer el método para que sea menos probable que le emitan un suplemento al presentar la solicitud.

La estructura molecular del tilpéptido determina que su perfil de impurezas sea mucho más complejo que el de los péptidos generales. Cuando realizamos estudios de impurezas, nos centramos principalmente en estas categorías:

Péptido faltante
Los 39 aminoácidos, cualquiera de los cuales se pierde durante el proceso de síntesis, son una impureza. Los tiempos de retención de los péptidos faltantes en HPLC estaban ampliamente distribuidos, con diferente polaridad de los péptidos faltantes en diferentes posiciones. Algunos faltan en el extremo N-terminal, algunos en el medio y otros cerca del sitio de unión de los ácidos grasos. Hemos recibido un pedido de un cliente de 15 péptidos faltantes en diferentes posiciones para localizar todas las posibles impurezas faltantes en su proceso.

Impurezas oxidantes
Met en la secuencia del tilpéptido es susceptible a la oxidación a sulfóxido y luego a sulfona. Las impurezas oxidadas suelen aparecer en los estudios de estabilidad y crecen después de un período de tiempo. Hemos hecho una comparación, en condiciones aceleradas durante un mes, el pico de oxidación puede crecer hasta más del 0,3%, sin control.

Productos para eliminar ácidos grasos
Esta es una impureza exclusiva del tilpéptido. Su cadena lateral de ácido graso (ácido eicosanodioico) está unida a la lisina a través de un conector, y esta modificación puede eliminarse parcialmente durante la síntesis o el almacenamiento, lo que da como resultado que el ácido graso-elimine las impurezas. Más problemático es que el desprendimiento puede ocurrir en diferentes ubicaciones - entre el ácido graso y el conector, o entre el conector y el péptido -, dando como resultado diferentes impurezas. Hemos sintetizado varias impurezas relacionadas con los ácidos grasos-para nuestros clientes, desde una eliminación completa hasta solo una pequeña sección.

Dímeros/polímeros
Dos o más moléculas de tilpéptido se agrupan para formar un dímero o más. El peso molecular del dímero es el doble que el del pico principal y, a menudo, es un pico amplio en HPLC, por lo que debe separarse y purificarse especialmente antes de poder usarse como control. Hemos preparado dímeros y fueron necesarias varias rondas de purificación para lograr una pureza de más del 95%.

Impurezas relacionadas con el enlazador-
La modificación del tilpéptido con ácido graso utiliza un conector (p. ej., -Glu, PEG, etc.), y este conector en sí puede producir reacciones secundarias durante la síntesis, generando impurezas con conectores faltantes o incompletos. Este tipo de impureza no se encuentra en los péptidos comunes, pero es exclusiva del tilpéptido, que debe estudiarse específicamente.

Impurezas desamidadas
La asparagina (Asn) y la glutamina (Gln) se desamidan fácilmente en condiciones ácidas o de calentamiento, lo que da como resultado isómeros. Hay varios Asn y Gln en la secuencia del tilpéptido, y la impureza de desamidación aparece a menudo en la prueba de degradación forzada, por lo que se debe utilizar el producto de control para localizar la impureza.

Diastereoisómeros
Durante la síntesis de cadena larga, los aminoácidos individuales pueden sufrir racemización, lo que da como resultado diastereoisómeros. El contenido de este tipo de impureza no suele ser elevado, pero los expertos preguntarán al declarar, y es mejor tener un producto de control para confirmarlo.

Muchas de estas impurezas no se pueden comprar y es necesario sintetizarlas de forma personalizada. Hemos realizado muchos proyectos sobre la personalización de impurezas de tilpéptidos, cubriendo todas las categorías anteriores.

La eliminación de la serie de péptidos.
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, con confirmación por EM y RMN. Hemos sintetizado un conjunto de péptidos con un espaciado de 5 aminoácidos desde el terminal N-al terminal C-.

Impurezas oxidantes
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95 % y podemos proporcionar el espectro LC-MS para confirmar el grado de oxidación. El sulfóxido y la sulfona se separan mediante HPLC y podemos hacer ambas cosas.

Productos para eliminar ácidos grasos
Esta es una de las impurezas más difíciles de trabajar en el tilpéptido. La cadena de ácido graso puede estar completamente desconectada o parcialmente (por ejemplo, faltan los últimos carbonos). Podemos sintetizar una serie de variantes para diferentes posiciones de la cadena. En uno de los proyectos más complicados que hemos realizado, el cliente nos pidió sintetizar una impureza a la que le faltaban 8 carbonos en la cadena de ácidos grasos y nos llevó dos meses hacerlo bien.

dímero
Los dímeros formados mediante-reticulación o interacciones no-covalentes se pueden preparar mediante diferentes métodos y se pueden aislar y purificar para proporcionar controles de alta pureza. Los dímeros son laboriosos de purificar, pero tenemos la experiencia para saber separar los monómeros.

Impurezas relacionadas con el enlazador-
El enlazador (-Glu, PEG, etc.) puede faltar o estar incompleto, lo que da como resultado una serie de impurezas relacionadas. Podemos sintetizar varias variantes con enlazadores faltantes, enlazadores acortados o enlazadores no coincidentes, y ayudarle a construir los espectros de dichas impurezas.

Impurezas desamidadas
Para los sitios Asn y Gln en la secuencia, podemos preparar controles de impurezas desamidados mediante degradación forzada o síntesis dirigida. La diferencia en el peso molecular después de la desamidación es solo 1, lo que no es fácil de distinguir mediante MS, por lo que generalmente utilizamos NMR o condiciones cromatográficas especiales para confirmar.

Otras impurezas personalizadas
Si encuentra una nueva impureza desconocida en su investigación, podemos ayudarlo a analizar la estructura y sintetizarla. Envíenos las muestras, haremos análisis LC-MS, deduciremos la estructura, luego la síntesis direccional y luego compararemos el tiempo de retención y el espectro de masas para confirmar la concordancia. Hemos realizado este proceso muchas veces y la tasa de éxito es bastante alta.

Desarrollo y validación de métodos analíticos.
Al configurar un método HPLC o LC-MS, se requiere un control de impurezas para la localización, determinación de la separación, verificación del rango lineal y recuperación. Sin el control, a la validación del método le falta una pieza. Muchos clientes nos piden que primero hagamos algunas impurezas clave para configurar el método y luego, lentamente, completemos el resto.

Espectrometría de masas heterogénea
Cuando se declara un medicamento genérico, se requiere un análisis cualitativo y cuantitativo integral de las impurezas del proceso y los productos de degradación. La ubicación, el contenido y la estructura de cada impureza deben confirmarse mediante un producto de control. Hemos visto la declaración de la información que se envió para completar, nueve de cada diez veces no entendieron las impurezas de esta pieza.

Estudios de estabilidad
En las pruebas de estabilidad a largo plazo y aceleradas, es necesario determinar qué productos de degradación son dominantes y cuál es la tendencia en el contenido. Con el control de impurezas, podemos cuantificar y monitorear con precisión. Un cliente estaba analizando la estabilidad de la preparación de tilpéptido y descubrió que un pico de degradación crecía muy rápido en condiciones aceleradas, por lo que lo analizamos y sintetizamos mediante MS para confirmar la estructura, y luego el cliente se sintió aliviado de informarlo.

Pruebas de lanzamiento por lotes
Después de la comercialización, cada lote de API o formulación debe analizarse para detectar la sustancia en cuestión. Los controles de impurezas son herramientas esenciales para las pruebas de liberación.

Información sobre declaraciones de medicamentos genéricos
Los estudios de impurezas son una sección clave de la información de presentación. Proporcionar datos completos de control y perfiles de impurezas reduce significativamente el riesgo de una publicación de revisión.

Caso 1: una empresa farmacéutica, programa de medicamentos genéricos de tilpéptido
Están desarrollando una versión genérica de tilpéptido y necesitan un conjunto completo de controles de impurezas para la validación del método. Personalizamos 12 impurezas para ellos: 5 péptidos faltantes, 2 impurezas oxidadas, 1 dímero, 2 productos de eliminación de ácidos grasos y 2 impurezas relacionadas con enlazadores-. Cada uno de ellos tiene una pureza superior al 95% y va acompañado de datos de MS y RMN. El líder del proyecto dijo: "Las impurezas del tilpéptido son el doble que las de otros péptidos, pero se pueden producir todas y los datos están completos, lo que nos ahorra mucho trabajo". Posteriormente, la validación de su método se completó con éxito y ahora se están preparando para la declaración.

Caso 2: Una empresa CRO, perfilado de impurezas
Llevaron a cabo un proyecto de investigación de calidad sobre tilpéptido, que requirió un análisis exhaustivo de las impurezas del proceso. Nos enviaron las muestras de péptidos crudos y realizamos análisis LC-MS, dedujimos las posibles estructuras de varias impurezas desconocidas, luego las sintetizamos de manera específica, comparamos los tiempos de retención y los espectros de masas, y confirmamos cuatro nuevas impurezas - dos de ellas estaban relacionadas con el enlazador-y dos de ellas eran variantes de eliminación de ácidos grasos. El cliente utilizó estos datos para refinar los perfiles de impurezas y aprobó con éxito la aceptación del cliente.

Caso 3: Estudios de estabilidad, una empresa de biotecnología
Estaban examinando la estabilidad de una formulación de tilpéptido y descubrieron que la cantidad de un producto de degradación aumentaba rápidamente en condiciones aceleradas, pero no sabían qué era. Analizamos la muestra mediante LC-MS y asumimos que era una impureza de desamidación en un determinado sitio de Asn, y luego la sintetizamos de manera específica y la confirmamos mediante comparación. Establecieron un ensayo utilizando este control y monitorearon con precisión la tendencia del producto de degradación. Posteriormente, cuando presentaron el informe, los expertos enfatizaron esta parte de los datos y, debido a los datos sólidos, no se emitió ninguna compensación.

El tilpéptido es un producto popular, pero el estudio de impurezas es un trabajo delicado, especialmente los productos de exfoliación con ácidos grasos y las impurezas relacionadas con enlazadores-, que muchos fabricantes no pueden manejar. Si está realizando una investigación de calidad o un desarrollo genérico de tilpéptido y necesita controles de impurezas, no dude en contactarnos. Hemos trabajado mucho, sabemos cuáles son las dificultades y sabemos cómo salir adelante.